泰安高新區(qū)藍豐園藝場 

藍莓初代培養(yǎng)的叢生芽切割成2cm左右的新梢，轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)。繼代培養(yǎng)基用劉慶忠等改良的WPM培養(yǎng)基。董朝莉研究了不同外植體類型對藍莓繼代增殖效果的影響，結(jié)果表明，莖段轉(zhuǎn)接后2～3d腋芽膨大，每個節(jié)萌發(fā)1～3個芽，3周后新芽長達1cm以上，新芽葉腋再萌芽形成分枝，增殖系數(shù)5—8倍。無菌芽的葉外植體接種3周后，部分葉外植體的基部、尖端及兩側(cè)均可直接出芽，而有些葉外植體要先形成一塊黃綠色愈傷組織，再由愈傷組織誘導(dǎo)形成芽，由葉外植體產(chǎn)生的芽在初期比莖段節(jié)處萌發(fā)的腋芽弱小，但是經(jīng)過壯苗培養(yǎng)后長勢和腋芽一樣1個葉片可出芽2～8個。因此，經(jīng)初代培養(yǎng)出的無菌芽苗的莖與葉都可用于繼代增殖，繼代增殖率可達10倍以上。藍莓莖段的離體不定芽增殖率除受到細胞分裂素調(diào)控外，還受生長素的影響。在供試的細胞分裂素中，添加BA處理的外植體增殖率及成苗率均低于添加ZT的處理，相對來說ZT的作用效果較好。離體莖段發(fā)生的不定芽增殖率與培養(yǎng)基中添加的ZT濃度密切相關(guān)，隨著ZT濃度的升高，不定芽的增殖數(shù)增大，ZT濃度為0.8mg／L時，增殖系數(shù)達到，為45，形成叢生芽體；當(dāng)ZT濃度高于0.8mg／L時，形成大量不定芽中的有效芽苗數(shù)量迅速減少，愈傷組織及芽苗成玻璃化現(xiàn)象嚴重。當(dāng)細胞分裂素濃度相同時，所用芽外植體越大，增殖系數(shù)越高且芽苗生長越旺盛。